木酮糖-5-磷酸(X5P)ELISA试剂盒-竞争法检测   
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    其他种属ELISA试剂盒

    木酮糖-5-磷酸(X5P)ELISA试剂盒-竞争法检测
    上海凯发K8旗舰生物从事酶联免疫学12年有余,技术成熟,产品稳定。凯发K8旗舰品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且给予实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

    中文名称 木酮糖-5-磷酸(X5P)ELISA试剂盒-竞争法检测
    规格 96T
    货号

    HB136-SH

    价格 ¥2500
    种属
    样本类型 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等
    检测范围 详见说明书
    灵敏度 详见说明书
    反应时间 1-5h
    样本体积 10ul
    检测波长 450nm
    货期 3-5天
    说明书 咨询我司业务员获取
    文献 咨询我司业务员获取

    本试剂盒仅供研究使用。  

    使用目的:

    本试剂盒用于测定样本中木酮糖-5-磷酸(X5P)的含量。

    实验原理

    本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本木酮糖-5-磷酸(X5P)水平。用纯化的木酮糖-5-磷酸(X5P)抗体包被微孔板,制成固相体,往包被单抗的微孔中加入木酮糖-5-磷酸(X5P),和HRP标记的木酮糖-5-磷酸(X5P)抗原,使它们竞争结合,,经过彻底洗涤后底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的木酮糖-5-磷酸(X5P)的含量相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),顺利获得标准曲线计算样品木酮糖-5-磷酸(X5P)的含量。  

    操作步骤

     

    1. 加样:分别设标准孔、空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

    2. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟   

    4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    7. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

    8. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

     

    计算

      以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

    注意事项

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    检测范围:

    20pg/ml-900pg/ml

    规格:

    96/

    保存条件及有效期

    1试剂盒保存:2-8℃

    2.有效期:6个月


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