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生化试剂盒
- 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒
- 凯发K8旗舰生物生化试剂盒应用领域广泛，涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富，涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪，分光光度计和荧光酶标仪。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户给予高效专业的生化代测服务和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格，所有这些保证了我们向您给予的最专业最优质的服务
| 中文名称 |
超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒 |
| 规格 | 96样 |
| 货号 |
A-001-SH |
| 价格 | ￥700 |
| 样本类型 | 血清，血浆，组织匀浆，细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
| 检测范围 | 详见说明书 |
| 检测方法 |
微板法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 咨询我司业务员获取 |
| 文献 | 咨询我司业务员获取 |
注 意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
SOD（EC 1.15.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是 H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。
测定原理：
顺利获得黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-)，O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，后者在 560nm 处有吸收；SOD 可清除 O2-，从而抑制了甲臜的形成；反应液蓝色越深，说明 SOD 活性愈低，反之活性越高。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 560nm。
2、 将试剂二用蒸馏水稀释两倍，用多少配多少。（试剂二和蒸馏水 1：1 稀释）
3、 将一瓶试剂四用 5mL 蒸馏水溶解（溶解后一周内用完），再用蒸馏水稀释 4 倍，用多少配多少（试剂四和蒸馏水 1：3 稀释）。
4、 测定前将试剂一、三和四在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）水浴 5min 以上。
5、样本测定（在 EP 管或 96 孔板中依次加入下列试剂）
|
试剂名称（μL） |
测定管 |
对照管 |
|
试剂一 |
45 |
45 |
|
试剂二 |
2 |
2 |
|
样本 |
18 |
|
|
蒸馏水 |
|
18 |
|
试剂三 |
35 |
35 |
|
试剂四 |
100 |
100 |
充分混匀，室温静置 30min 后，560nm 处测定各管吸光值 A。
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1，建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用（10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水）。
4、SOD 为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是
（1）试剂二或试剂四没有现配现用；
（2) 没有按顺序加试剂；
（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间 30min 可以延长到 40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10 倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
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